Temat: touch down

Witam!
Moje pytanie zwiazane jest z metodą touch down, czym ona sie dokładnie charakteryzuje?
pozdrawiam

Temat: touch down

Touchdown PCR to odmiana łańcuchowej reakcji polimerazy (PCR) zapewniająca zmniejszenie udziału (a nawet całkowitą eliminację) niespecyficznego produktu w namnożonym DNA.

Polega na stopniowym obniżaniu temperatury przyłączania starterów (ang. annealing), zaczynając od równej lub wyższej temperaturze topnienia specyficznie związanych starterów. Zazwyczaj obniża się o 1 °C co 1-2 cykle. Wysoka temperatura w początkowej fazie reakcji skutkuje powstaniem tylko specyficznych produktów, które przeważają w mieszaninie reakcyjnej w kolejnych cyklach. Oczywiście w niższej temperaturze mogą powstawać również produkty niespecyficzne, ale Większa ilość specyficznych matryc (pożądanych fragmentów DNA) zapewnia dominację specyficznego produktu w końcowym amplikonie.

Idea metody bazuje na eksponencjalnym wzroście ilości produktu w miarę postępu reakcji - specyficzne odcinki zaczynają być namnażane najwcześniej więc będzie ich najwięcej.

Metodę opracował R.H. Don w 1991 roku.